ТОДОРХОЙЛОЛТ
A. Шинэ бүтээлийн нэр
Хорт хавдартай холбоотой бодисын Раман тоон хэмжээг тодорхойлох арга
Б. Хамаарах болон ашиглах технологийн салбар
Энэхүү шинэ бүтээл нь хорт хавдар даамжрахтай зэрэгцэн ихсэх цусан дахь хорт хавдартай холбоотой бодис, голчлон чөлөөт ДНХ-г зорилгоо болгосон хорт хавдартай холбоотой бодисын Раман тоо хэмжээг тодорхойлох аргад хамаарна.
B. Оршил
Урьд өмнөөс, хорт хавдрын оношилгооны аргын нэг болгон, хорт хавдар даамжрахтай зэрэгцэн цусанд үзэгдэн ихсэх хорт хавдартай холбоотой бодисыг илрүүлэх аргыг ашигладаг. Энд, хорт хавдартай холбоотой бодис гэж хорт хавдартай өвчтөний биеийн шингэнээс гаргаж авсан хавдрын өөрийн онцлог биет бөгөөд, ерөнхийдөө хавдаржсан эс эвдэрсэн зэрэг тохиолдолд цусанд чөлөөлөгдөх, уг эвдэрсэн хавдрын эсээс гаралтай уураг зэргийг хэлнэ. Тэгээд, уламжлалт хорт хавдрын оношилгооны аргаар бол, цусан дахь хорт хавдартай холбоотой бодисын тоон хэмжээний утга нь тогтмол утга ба түүнээс дээш байх тохиолдолд, шинжлүүлэгч нь хорт хавдраар өвчилсөн байх магадлал бий гэж үздэг. Ийнхүү хавдаржсан эсийн эвдрэл зэргээр цусанд чөлөөлөгдөх хорт хавдартай холбоотой бодисын хувьд, зөвхөн уураг төдийгүй ДНХ мөн ижилхэн чөлөөлөгддөг нь мэдэгдэж байгаа болно. Тэгээд, эрүүл хүн ба хорт хавдартай өвчтөнийг харьцуулахад цусан дахь хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ (ct NDA)-imh хэмжээ нь хорт хавдартай өвчтөнийх нь эрүүл хүнээс нэлээд их гэдэг нь мэдэгдэж байгаа болно. Тийм учраас, цус гэх мэт биеийн шингэн дэх хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийн хэмжээг тодорхойлсноор, шинжлүүлэгчийг хавдраар өвчилсөн эсэхийг оношлох боломжтой болно гэж үзэж, иймэрхүү хавдрын оношилгооны арга болгон, жишээлбэл, полимеразын гинжин урвал (PCR)-biH арга зэргээр өсгөсөн 200Ьр ба түүнээс дээш ДНХ нь, биеийн шингэн болон биеэс гадагшлах ялгадас зэрэгт илэрсэн тохиолдолд, шинжлүүлэгч нь хавдраар өвчилсөн байх магадлалтай гэж оношлон, улмаар уг ДНХ-ийн мутацид дүн шинжилгээ хийх арга (Патентийн референс материал 1), биеийн шингэн зэрэгт агуулагдах эсийн тунадасаас гаралтай геном ДНХ-ийн хэмжзэг тодорхойлж, тэр утга нь тогтмол утга ба түүизэс дээш утга байх тохиолдолд, дахин ДНХ-ийн шинжилгээ хийх арга (Патентийн референс материал 2)- ыг санал болгосон байгаа болно. Дашрамд хэлэхэд, оношилгоогоор хавдраар өвчилсөн гэдгийг тогтоосон ч, биеийн шингэн дэх зөвхөн ДНХ-ийн хэмжээг тодорхойлсноор хавдар үүссэн эрхтэнииг олж тогтооход хүргэхгүй. Тэгээд, хавдар үүссэн тохиолдолд, уг хавдар үүссэн эрхтнээс онцгой ДНХ-ийн мутаци үүсдэг нь мэдэгдэж байгаа болно. Тийм учраас, ДНХ-ийн мутацийн төрлийг тодорхой болгосноор хавдар үүссэн эрхтэнийг тодорхойлох боломжтой. Энд ДНХ-ийн мутаци гэж ДНХ- ийн цэгэн мутаци, хромосомын согог болон өсөлт зэрэг бүтцийн гажгийг хэлнэ. Жишээлбэл, нойр булчирхайны хорт хавдрын ойролцоогоор 70 хувьд, K-ras генд цэгэн мутаци үүсдэг нь мэдэгдэж байгаа болно., Мөн гетеро холбооны гээгдэл (Loss of heterozygous, цаашид LOH гэж товчлох)-ын шинжилгээгээр ч хавдрын төрөл тус бүрт өвөрмөц хромосомын мөрийн хомсдол нь мэдэгдэж байгаа бөгөөд, жишээлбэл уушигны хорт хавдрын үед 3 дугаар хромосомын богино мөр дээр LOH төвлөрсөн байдаг нь мэдэгдэж байгаа болно. Мөн хөхний хавдрын үед 8 дугаар хромосомын урт мөрний өсөлт болон, RB2-biH өсөлт мэдэгдэж байгаа болно. Иймд, хавдрын эсээс гаралтай ДНХ-ийн хэмжээг тодорхойлж, хавдрын оношилгоог өндөр нарийвчлалтайгаар хийх аргыг санал болгож, шинжлүүлэгчээс авсан цусны сийвэнгээр чөлөөт ДНХ-ийг гаргаж авах үе шат ба, гаргаж авсан чөлөөт ДНХ-ийн хэмжээг тодорхойлж, цусны сийвэнгийн нэгж эзэлхүүн дэх чөлөөт ДНХ-ийг тооцоолох үйл үе шат ба, тооцоолж гаргасан чөлөөт ДНХ-ийн утгыг 1 дүгээр босго утга ба түүнээс дээш 2 дугаар босго утгатай харьцуулах үе шат ба, тооцоолсон утга нь 1 дүгээр босго утгаас бага тохиолдолд шинжлүүлэгч нь хавдраар өвчилсөн байх магадлал өндөр гэж тодорхойлон, нөгөө талаар 2 дугаар босго утга ба түүнээс дээш байх тохиолдолд хэвийн эсээс гаралтай ДНХ нь цусны сийвэн дотор холилдсон гэж тодорхойлдог хорт хавдрын оношилгооны аргыг санал болгосон байна (Патентийн референс материал 3).
Мэдэгдэж байгаа технологийн баримт бичиг
Патентийн референс материал
Патентийн референс материал 1: АНУ-ын шинэ бүтээлийн патент №6143529
Патентийн референс материал 2: АНУ-ын патент 2004/0259101А1
Патентийн референс материал 3: Олон улсын патентийн нийтлэл W02008/090930A
Патентийн референс материал 4: Япон Улсын шинэ бүтээлийн патент Токукай 2011- 81001
С. Шийдлийн агуулга
Шийдлийн шийдвэрлэхийг зорьж буй асуудал
Гэвч, жишээлбэл, нийт цусан дахь хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийн хэмжээг тодорхойлъё гэвч, түүний хэмжээ нь маш бага байдагтай харьцуулахад, нийт цусан дахь хэвийн эс болох лимфоцитийн гаралтай ДНХ нь их хэмжээгээр агуулагдаж байдаг. Улмаар нийт цуснаас ДНХ-ийг тэр чигээр нь гарган авсан ч, хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ- ийн хэмжээг тодорхойлох нь хүндрэлтэй. Иймд, жишээлбэл, нийт цуснаас салган авсан цусны сийвэнг ашиглан, цусны сийвэн дэх хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийг гарган авч хэмжээг нь тодорхойлох арга байж болох боловч, ДНХ-ийг гарган авах аргын хувьд, лимфозит зэрэг хэвийн эсээс гаралтай ДНХ холигдсон байх тохиолдол байдаг ба, хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ бус, хэвийн эсээс гаралтай ДНХ-ийн хэмжээг тодорхойлчихдог тохиолдол байдаг тул хорт хавдрын оношилгоо алдаатай гарах магадлалтай. Иймд, хорт хавдрын үнэн зөв оношилгоонд, хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ (энэхүү шинэ бүтээлд гистонд ороогдон наалдсан ДНХ-ийг хэлнэ)-ийн хэмжээг зөв тодорхойлох нь чухал бөгөөд, маш бага хэмжээний чөлөөт ДНХ-ийг хэрхэн хялбар бөгөөд түргэн гаргаж авах, хэвийн эсээс гаралтай ДНХ-ийг хэрхэн салгаж, чөлөөт ДНХ-ийг илрүүлэх нарийвчлалыг сайжруулах, маш бага хэмжээний ДНХ-ийг нарийвчлал сайтайгаар хэрхэн илрүүлэх нь хорт хавдрын тохиромжтой оношилгоонд шаардлагатай. Дашрамд дурьдахад, цусан дахь маш бага хэмжээний ДНХ-д дүн шинжилгээ хийх арга барил болох Раман спектрометрийн аргыг ашиглан, чанарын болон тоон үзүүлэлтээр илрүүлэх аргыг санал болгох нь чухал гэгдэх ч, SERS үзэгдэл нь 1) механизм нь төгс ойлгогдоогүй байгаа төдийгүй, 2) бүтцийг нь нарийн тодорхой тодорхойлсон нано бодисын синтез ба удирдлага нь хүндрэлтэй байх болон, 3) спектрийг хэмжих үед ашиглагдах гэрлийн долгионы урт, гэрлийн туйлшралын өнцгөөс хамаарсан өсгөлтийн бүтээмжийн өөрчлөлт зэргээс хамаараад давтан хийгдэх байдал болон найдвартай байдлын тал дээр шийдвэрлэх асуудал олон байгаа ба, нанобиосенсорын хөгжүүлэлт болон арилжаанд оруулалтаас авахуулаад SERS үзэгдлийн хэрэглээнд маш том сорилт болон үлдсэн бөгөөд, нано утас ба нано партиклын гибрид бүтцийг ашиглан, биологийн ханд ба уураг, ДНХ зэрэг биомолекулын SERS дохионы нэмэгдэл ба хэмжилтийн сэргээгдэх байдал, хэврэг байдлын зэрэг болон найдвартай байдлыг сайжруулах технологийг санал болгосон байгаа (Патентийн референс материал 4) боловч, нано утас ба нано партиклын гибрид бүтэц нь хүлээн авагчаар дамжуулан шинжлэх объектийг шингээх бөгөөд, маш бага хэмжээний хавдрын эсээс гаралтай ДНХ-ийг илрүүлэх аргын хувьд тохиромжтой биш юм.
Асуудлыг шийдвэрлэх арга зам
Иймд, энэхүү шинэ бүтээлийн зохиогчид, шинжлэх объект болгох ёстой зүйл нь, хорт хавдар тусахад хялбар эсвэл туссан үед цусан дотор ихсэх хорт хавдартай холбоотой бодис, жишээлбэл хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийг, хүлээн авагчаар дамжуулалгүй, шууд илрүүлэх нь хамгийн сайн гэж үзэж, эрчимтэйгээр судалгаа явуулсан. Энд, шинжпэх ёстой объект болох чөлөөт ДНХ нь ороосон утастай тэнцэхүйц гистон хэмээх уургийг ороож наалдсан байдаг ба, нэг ороосон нэгж бүтэц (1 сет)-ийг нуклеосом гэж нэрлэдэг бөгөөд, нуклеосом цуглараад утас хэлбэртэй болсон бүтцийг хроматин (ширхлэг) гэж нэрлэдэг. Тэгээд, эс хавдаржиж хуваагдалт давтагдах үед хавдар томроход таагүй ген (хавдрыг эсэргүүцэх ген)-ийг гарч ирэхгүй байлгахын тулд гистоныг сайтар ороон наалдаж таглан, гистоныг улам нягт ороож, ДНХ нь хялбар тайлагдахгүйгээр метилжих гэх модификаци үүсдэг боловч, энгийн гистон (+), ДНХ (-)-аар цэнэглэгдэж, энэ хоёр хоорондоо соронз мэт таталцаж, тэрбайтугай метилжиж тайлагдахгүй байхаар болсон байдаг ба, гистоныг ороон наалдсан ДНХ нь (+) цэнэгтэй болсон байна (Зураг 11(а)-г харах). Нөгөө талаар, ацетилжилт (-)-т цэнэглэгдэхийн тулд, энгийн үед (+) гистон нь ацетилжвэл хоёул (-) болон ДНХ-тэй түлхэлцдэг. Тэгснээр, ДНХ хэмээх "утас" нь гистоноос тайлагдаж ген илрэх механизм болно (Зураг 11(Ь)-г харах). Улмаар, хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийг сонгон шингээхийн тулд, гистоныг ороон наалдсан ДНХ нь (+)-ээр цэнэглэгдсэн тул, шингээх субстракт (-)-аар цэнэглэгдэх нь тохиромжтой гэж үзнэ. Дашрамд дурьдахад, энэхүү шинэ бүтээлийн зохиогчид металл комплекс усан уусмалыг комплексийг бүрэлдүүлэх металлаас нам электродын потенциал (иончлолын хандлага их)-ын металл субстрат дээрх электродын потенциалын зөрүүгээр химийн ангижралыг явуулж квант талст (нано хэмжээтэй металл комплексийн талст)-ыг барьцалдуулдаг. Мөнгөний комплексийн тохиолдолд, мөнгөний тиосульфатын усан уусмалыг мөнгөнөөс нам электродын потенциал (иончлолын хандлага их)-ын зэс ба зэсийн хайлш дээр барьцуулдаг тул мөнгөний комплексийн квант талстыг химийн ангижрах аргыг ашиглан бүрэлдүүлдэг. Дэлгэрүүлбэл, металл комплексийн усан уусмал дахь концентрацийг голчлон бүрэлдэх квант талстын хэмжээг бодолцон тодорхойлох ёстой бөгөөд саармагжуулагчийг ашиглах үед түүний концентрацийг бодолцох нь зөв бөгөөд, энгийн үед 100ррт-ээс 5000ррт-ийн хүрээнд ашиглах боломжтой боловч, лигандын функцээс мөн хамаарч нано кластер гэж нэрлэвэл зохих нано хэмжээг бэлтгэхэд 500-аас 2000ррт-ийн концентраци тохиромжтой. Квант талстыг бүрэлдүүлэх металл комплекс нь суурь металл (supported metal)-biH электродын потенциал Е-тэй харилцан хамааралтай тэгшитгэл (l)-aap илэрхийлэгдэх комплексийн тогтвортой байдлын тогтмол (log(3) ба түүнээс дээш байхаар сонгогдоно.
(Энд Е нь стандарт электродын потенциал, R нь хийн тогтмол, Т нь үнэмлэхүй температур, Z нь ионы валент, F нь Фарадейн тогтмолыг илэрхийлнэ.) Энд, металл комплекс нь Au, Ag, Pt эсвэл Pd-ээс сонгогдох плазмон металлын комплекс байх тохиолдолд, Раман гэрлийн хувьд хязгаарлагдмал гадаргын плазмон резонансыг нэмэгдүүлэх нөлөөтэй. Ялангуяа, металл комплекс нь мөнгөний комплекс байх үед, тогтвортой байдлын тогтмол (үүсэх тогтмол) (log (3i) нь 8 ба түүнээс дээш мөнгөний комплексжуулах бодис ба галогент мөнгөтэй урвалаар бүрэлдэх нь дээр бөгөөд, галогент мөнгөний хувьд мөнгөний хлорид тохиромжтой ба комплексжуулах бодисын хувьд тиосульфатын давс, тиоционатын давс, сульфитийн давс, тиомочевин, калийн иодид, тиосалицилийн хүчлийн давс, тиоцианулийн давс дотроос сонгогдох нэг төрөл байх нь тохиромжтой. Мөнгөний комплекс нь 5~20нм дундаж диаметртэй нано кластераас бүрэлдэх квант цэгтэй, квант талстын хэмжээ нь 100~200нм болно. Зарцуулагдах мөнгөний комплексийг галоген ионы оролцоотойгоор шүлтээр үйлчлэхэд (гипохлоритийн хүчлээр үйлчлэх), доорх урвалаар мөнгөний галогент бодисыг цөм болгон мөнгөний хэт ислийг агуулж, мөнгөний оксидын композит болох зүү хэлбэртэй нано талст бүлэг бүрэлдэж (Зураг 9), тэрбайтугай усан дотор (-) цэнэгтэй болохын нөгөөтэйгүүр, гистоныг ороож наалдсан ДНХ нь (+) цэнэгтэй болох тул (Зураг 11(a)), уг чөлөөт ДНХ-ээр төлөөлөгдөх эерэг цэнэгтэй болсон хорт хавдартай холбоотой бодисыг сонгон шингээдэг болохыг мэдсэн. Тэрбайтугай мөнгөний хэт ислийг агуулах мөнгөний оксидын зүү хэлбэртэй нано талстын бүлгийг лазер гэрэл тусган ангижруулж, металл мөнгийг салгаж авахын тулд, лазер гэрэл тусгаснаар гадаргын плазмон нэмэгдүүлэх нөлөөг харуулж, шингэсэн чөлөөт ДНХ-ээр төлөөлөгдөх хорт хавдартай холбоотой бодисыг илрүүлэх гадаргын нэмэгдүүлэх Раман сарнил (SERS)-bir олж авч чадахыг мэдсэн.
Энэхүү шинэ бүтээл нь дээр дурьдсан мэдлэг дээр үндэслэн хийгдсэн зүйл бөгөөд, мөнгөний галогент бодис эсвэл галогенийг агуулах мөнгөний оксидын композит зүү хэлбэртэй нано талст бүлгийг агуулж, усан дотор сөрөг цэнэгийг үзүүлж, эерэг цэнэгтэй хорт хавдартай холбоотой бодисыг шингээн, цэнэгийн шилжилтийн комплексийг бүрэлдүүлэх боломжтойн зэрэгцээ гэрэл тусгаснаар мөнгөний партиклыг сЭлган гаргах боломжтой ба, лазер тусгаснаар гадаргын плазмон нэмэгдүүлэх нөлөөтэй болох бүсийг агуулахыг онцлог болгосон хорт хавдартай холбоотой бодисыг хэмжихэд зориулсан биочипийг зорилгоо болгосон болно.
Шийдлийн хурч болох үр дун
Энэхүү шинэ бүтээлийн мөнгөний оксидын композит зүү хэлбэртэй нано талст бүлэг бол мөнгөний хэт ислийг агуулах мөнгөний оксид нь өөрөө угсрагдан бүрэлдэж мэдрэлийн эс хэлбэртэй гурван хэмжээст супер бүтцэт биет (мезо талст гэх)-ийг бүрэлдүүлэх зүйл бөгөөд (Зураг 12 ба 13), мөнгөний ионы усан уусмалыг Ag/AgCI электродыг ашиглан тогтмол потенциалт электрокристализаци явуулж бүрэлдүүлж болох боловч, мөнгөний комплекс квант талст, жишээлбэл тиосульфат мөнгөний квант талстыг галоген ионий оролцоотойгоор шүлтээр үйлчилж (гипохлорит натрийн усан уусмалаар үйлчлэх) хялбараар бүрэлдүүлж болно. Мөн, энэхүү шинэ бүтээлийн биочипийг ашигласнаар, Раман дүн шинжилгээгээр цусанд агуулагдах биологийн дээжин дэх хорт хавдартай холбоотой бодис, жишээлбэл хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийг доорх аргаар хэмжээг нь тодорхойлж чадна. Өөрөөр хэлбэл, галогент мөнгө эсвзл галогенийг агуулах мөнгөний оксидын композит зүү хэлбэртэй нано талст бүлэг, өөрөөр хэлбэл мөнгөний хэт ислийг агуулах мөнгөний оксидын мезо талст бүс (Зураг 12 ба 13)-ийг агуулах биочипийг бэлтгэн, өмнө дурьдсан биочипийн зүү хэлбэртэй нано талст бүлгийн бүсэд ийлдэс эсвэл биологийн дээж шингэнийг дусааж, дээжин доторх эерэг цэнэгтэй хорт хавдартай холбоотой бодисыг сонголтоор шингээж, шингээсэн хорт хавдартай холбоотой бодист лазер тусгаж, тэндээс Раман сарнилын гэрлийг илрүүлэх үйл явцаар, гадаргын нэмэгдүүлэх Раман сарнил (SERS)-biH далайцаар хавдрын өвчлөлтийг тодорхойлж чадна. Ийлдэс доторх хорт хавдартай холбоотой бодисын хувьд, хавдрын эсээс гаралтай гистоныг ДНХ ороож бүтэх ДНХ (энд чөлөөт ДНХ гэх), уг нэг ороосон нэгж бүтэц (1 сет)-ийн нуклеосом цугларч, утас хэлбэртэй болсон бүтэц бүхий хроматин (ширхлэг)-ийг агуулна. Түүнчлэн, эерэг цэнэгтэй глобулиныг агуулах боловч, түүний өсөлт нь бусад хорт хавдартай холбоотой бодистой харьцуулахад хамгийн ихдээ 2 дахин их ба түүнээс доош байдаг учраас, энэхүү шинэ бүтээлээр шинжпэх бодис нь хавдаржих үйл явцын улмаас өсөх өсөлт 100 дахин ба түүнээс дээш утга хүрэх учраас глобулинаас бусад өсөлт (хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ) нь илэрч байгаа гэдгийг өгүүлж байна. Мөн, хэвийн эсээс гарах ДНХ, ацетилжиж гистон нь салсан ДНХ, тэгээд альбумин нь ийлдсийн ойролцоогоор 60%-ийг ззлэх боловч, сөрөг цэнэгтэй болох тул, энэхүү шинэ бүтээлээр бол шингэхгүй. Тийм учраас хорт хавдартай холбоотой бодисын хэмжээг тодорхойлох үзлэгт маш тохиромжтой. Мөн, энэхүү шинэ бүтээлийн зүү хэлбэртэй нано талст (мөнгөний хэт ислийг агуулах мөнгөний оксидын мезо талст) нь, мөнгөний хэт ислийг агуулах мөнгөний оксид нь усан уусмал дотор сөрөг цэнэгтэй болохдоо хялбар ба, дээж (зорилтот молекул)-тэй шүргэлцэж цэнэг шилжих комплексийг бүрэлдүүлнэ гэж бодогдоно. Түүнчлэн, мөнгөний оксид нь гэрлийн энергийг хүлээн авч ангижран, металл мөнгийг ялгаруулан кристаллизаци явагдах тул, цэгцтэйгээр дараалан байрлах металл нано партиклд байдаг гадаргын плазмон резонансыг нэмэгдүүлэх үйлчилгээтэй болно. Улмаар, энэхүү шинэ бүтээлийн зүү хэлбэртэй нано талст (мезо талст) нь металл биш боловч металлын шинж чанар ба ионжих шинж чанарыг хоёуланг агуулах тул, гадаргын нэмэгдүүлэх Раман сарнил (SERS)- bir хэмжихэд зориулсан тохиромжтой биочипийг санал болгож чадна. Квант талстыг бүрэлдүүлэх металл комплекс нь суурь металл (supported metal)-biH электродын потенциал Е-тэй харилцан хамааралтай тэгшитгэл (l)-aap илэрхийлэгдэх комплексийн тогтвортой байдлын тогтмол (logp) ба түүнээс дээш байхаар сонгОгдоно.
(Энд Е° нь стандарт электродын потенциал, R нь хийн тогтмол, Т нь үнэмлэхүй температур, Z нь ионы валент, F нь Фарадейн тогтмолыг илэрхийлнэ.) Энэхүү шинэ бүтээлийн хувьд, металл комплекс нь Au, Ag, Pt эсвэл Pd-ээс сонгогдох плазмон металлын комплекс байх тохиолдолд, Раман гэрлийн хувьд гадаргын плазмон резонанс нэмэгдүүлэх нөлөөтэй болно. Металл комплекс нь мөнгөний комплекс байх үед, тогтвортой байдлын тогтмол (үүссэн тогтмол)(1од pi) нь 8 ба түүнээс дээш мөнгөний комплексжуулах бодис ба галогент мөнгөтэй урвалаар бүрэлдэх нь тохиромжтой. Галогент мөнгөний хувьд мөнгөний хлорид тохиромжтой ба, комплексжуулах бодисын хувьд тиосульфатын давс, тиоционатын давс, сульфитийн давс, тиомочевин, калийн иодид, тиосалицилийн хүчлийн давс, тиоцианулийн давсаас сонгогдох нэг төрөл байх нь тохиромжтой. Мөнгөний комплекс нь 5~20нм дундаж диаметртэй нано кластераас бүрэлдэх квант цэгтэй ба, квант талстын хэмжээ нь 100~200нм болно. Металл комплексийн усан уусмалын концентрацийг, голчлон бүрэлдэх квант талстын хэмжээг бодолцон тодорхойлох хэрэгтэй бөгөөд, саармагжуулагчийг ашиглах үедээ уг концентрацийг ч мөн бодолцох нь зөв. Энгийн үед, 100ррт-ээс 5000ррт-ийн хүрээнд ашиглагдах боломжтой боловч лигандын функцээс хамаарч нано кластер гэж нэрлэвэл зохих нано хэмжээг бэлтгэхэд 500-аас 2000ррт байх концентраци тохиромжтой. Металл субстракт эсвэл металл партикл дээр бүрэлдсэн квант талст нь металл комплекс талстын хувьд усан уусмалд эерэг туйлшралтай болохдоо хялбар гэгддэг ба биологийн дээжин дэх уургийг наалдуулан тогтоохын тулд галоген ионы оролцоон дор шүлтээр үйлчилж, жишээлбэл рН 11 ба түүнээс дээш гипохлорит содын усан уусмалыг дусааж, туйлшралыг зохицуулах нь тохиромжтой. Квант талст нь дахин талсжиж усан уусмал дотор сөрөг туйлшралтай болох төдийгүй, мөнгөний оксидын композит зүү хэлбэртэй нано талст нь хэт исэлтэт бодисыг бүрэлдүүлэх учраас дээжин дэх хорт хавдартай холбоотой бодис нь эерэг цэнзгтэй хорт хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийг тогтооход дэмжлэг үзүүлж чадна. Дээжин дэх нийт уургийн концентрацийн хэмжээг, заасан долгионы урттай лазер гэрлийг тусгаж, Раман спектрийг гаргаж авснаар мэдэж болно. Зураг 3 бол шулуун гэдэсний хорт хавдартай өвчтөний ийлдсийн дээж бөгөөд, түүнийг 10 дахин, 100 дахин, 500 дахин, 1000 дахин болон 10 мянга дахин цэвэр усаар шингэлж бЗЗнм-ийн лазер (30mW)-aap хэмжсэн Раман спектр бөгөөд, концентрацийн хамт дагасан оргил утга (PSV) ба оргил интеграл утга өөрчлөгдөнө. Ингэснээр, цусны ийлдэс дэх нийт уургийн хэмжээний дүн шинжилгээг хийж чадна гэдэг нь мэдэгдэж байгаа болно. Ялангуяа нүүрстөрөгчийн өөрийн онцлог болох G (1300-1400ст-1ойролцоох) болон D зурвас (1550-1600ст-1ойролцоох)-т оргил цэг үзэгдэх ба, метил бүлгийн өөрийн онцлог болох 2900cm"1 ойролцоо ч мөн оргил цэг ажиглагдаж болохыг мэдсэн. Энэ нь хорт хавдартай холбоотой бодисын хувьд гистоныг ДНХ ороож метилжсэн байдлаар илэрсэн болохыг өгүүлж буй зүйл гэдэг нь таамаглагдаж байна. Тийм учраас, олж авсан Раман спектрийн оргил цэгийн өндөр, оргил цэгийн интеграл утга, оргил цэгийн илрэх хугацаа гэх мэт мэдээллээс хавдрыг тодорхойлох болон даамжралын байдлыг анализ хийж чадна. Зураг 1 бол Раман долгионы оргил цэгийг тооцоолох аргыг илэрхийлэх ба, хүний ийлдсийн дээжийн бЗЗнм лазерын Раман сарнилын спектр нь 1350cm-i ойролцоо ба 1550cm-i ойролцоо сарнилын хүчний оргил цэгийг бүрэлдүүлж чадах нь бататгагдсан байна. Тиймээс, 800см-1(а) ба 2000ст-1(б)-ийн сарнилын хүчний дундаж утга(т)- ыг суурь гэж үзэн хамгийн их өсөлтийн утга (р-т)-г дагасан оргил утга (Shifting Peak Value: PSV) гэж тодорхойлсон. Мөн, оргил цэгийн нийт талбайг оргил цэгийн интеграл утга гэж тодорхойлсон. Эдгээр дагасан оргил утга болон оргил цэгийн интеграл утга нь хүний ийлдэс дэх хорт хавдартай холбоотой бодисыг харахад чухал шаардлагатай бөгөөд, оргил цэг илрэх хугацаатай зэрэгцэн, хорт хавдрыг тогтоох болон даамжралын зэргийг заах индекс болгож болно.
Д. Зургийн товч тайлбар
Зураг 1. Раман долгионы оргил цэгийг тооцоолох аргыг илэрхийлэх ба, хүний ийлдсийн дээжийн бЗЗнм лазерын Раман сарнилын спектр нь 1350cm"1 ойролцоо ба 1550cm"1 ойролцоо сарнилын хүчний оргил цэгийг бүрэлдүүлэхийг үзүүлсэн.
Зураг 2А. Ходоодны хорт хавдрын өвчтөний жишээ 12-оос авсан ийлдсийг тохируулсан дээжийн Раман спектр зураг болно.
Зураг 2В. Шулуун гэдэсний хорт хавдрын өвчтөний жишээ 12-оос авсан цусны ийлдсийг тохируулсан дээжийн Раман спектр зураг болно.
Зураг 2С. Хоргүй өвчин бүхий өвчтөний жишээ 12-оос авсан ийлдсийг тохируулсан дээжийн Раман спектр зураг болно.
Зураг 2D. Ходоодны хорт хавдар, шулуун гэдэсний хорт хавдар, хоргүй өвчний дээжийн раман сарнилын дагасан оргил утгын харьцуулалтыг харуулах график болно.
Зураг 3. Шуг1уун гэдэсний хорт хавдрын өвчтөний жишээ 12-оос авсан ийлдсийг тохируулсан шингэлсэн дээж ба раман сарнилын хүчний хамаарлыг харуулах Раман спектр бөгөөд, дээжийн концентраци ба сарнилын хүчний дагасан оргил утга нь харилцан хамааралтайг үзүүлсэн.
Зураг 4. Бодит хэрэгжүүлэх жишээ 1-ээр харуулах шинэ SERS субстрат үүсгэх аргын дарааллыг үзүүлсэн тайлбар зураг бөгөөд, зүүн дээр байгаа Ml TECH Co.,Ltd үйлдвэрлэсэн субстрат нь баруун хажуу талын SEM дүрсийг харуулж буй гэрэл зураг болно.
Зураг 5. Бодит хэрэгжүүлэх жишээ 1-ээр үйлдвэрлэсэн нано партиклын барьцалдсан биет (квант талст)-ын төрөл тус бүрийн SEM зургийг харуулсан гэрэл зураг болно.
Зураг 6. Нано партиклын томруулсан SEM зураг болно.
Зураг 7. Фосфортой хүрэл хавтан дзэр дусаасны дараа тавьж орхисон хугацаа ба квант талст хэлбэрийн хамаарлыг харуулах зураг болно.
Зураг 8. Квант талстын EDS спектр (элементийн анализ)-ийн үр дүнг харуулах график болно.
Зураг 9. Квант талстыг галоген ионы оролцоотойгоор шүлтээр үйлчилсэн (гипохлоритоор үйлчлэх) үеийн SEM зураг болно.
Зураг 10А. Шүлтээр үйлчилсэн квант талстын доторх зүү хэлбэртэй талстыг харуулах зураг болно.
Зураг 10В. Регби бөмбөг хэлбэрийн бөөгнөрлийг харуулсан зурагболно.
Зураг 10С. Том бөөгнөрлийн EDS спектр (элементийн анализ)-ийн үр дүнг харуулах график болно.
Зураг 11 Метилжсэн чөлөөт ДНХ(а) ба ацетилжсан ДНХ(Ь)-ийн функцийн тайлбар зураг болно.
Зураг 12. Зураг 1-ийн квант талстын субстратыг галоген ионы оролцоотойгоор үйлчилсэн (гипохлоритоор үйлчлэх) үеийн SEM зураг (дээд талын зураг) ба, дахин талстжуулсан субстратын EDS спектр (элементийн анализ)-ийн үр дүнг харуулах график (доод талын зураг) болно.
Зураг 13. Шүлтээр үйлчилсэн дахин талстжуулсан субстратын XPS хэмжилтийн үр дүнг харуулна.
Зураг 14. Дахин талстжуулсан субстратын гадаргыг хүчлээр түлсний дараах XPS хэмжилтийн үр дүнг харуулна.
Е. Шинэ бүтээлийг хэрэгжүүлэх арга зам
Дараах зургийг ашиглан, энэхүү шинэ бүтээлийн бодитоор хэрэгжүүлэх арга замыг дэлгэрэнгүй тайлбарлав. (Бодит хэрэгжүүлэх жишээ 1)
Зураг 4 дээр үзүүлсэнчлэн, мөнгөний тиосульфатын ЮООррт усан уусмалыг бэлтгэж, түүний 1 дуслыг фосфортой хүрэл хавтан дээр дусаан, ойролцоогоор 3 минут байлгаж, уусмалыг үлээн арилгахад, баруун хажуугийн SEM зурагт харуулсан
Орчуулга: PCT/JP2014/062318 fW02Q14/181816A1) квант талст үүссэн байв.
Зураг 5 бол бодит жишээ 1-ээр үйлдвэрлэсэн нано партиклын барьцалдсан биет (квант талст1-ийн төрөл тус бүрийн SEM зургийг харуулсан гэрэл зураг бөгөөд,
Зураг 6 нь нано партиклын томруулсан SEM зургийг харуулсан болно. ЮОнм орчмын нимгэн зургаан өнцөгт цилиндр хэлбэртэй талст бөгөөд, гадарга дээрээ хэдэн нм хэмжээний овгор товгор үүссэн байна. Металл нано талстад байдаг онцлог фасет үзэгдсэнгүй.
Зураг 7 нь фосфортой хүрэл хавтан дээр дусаасны дараа тавьж байлгасан хугацаа ба квант талст хэлбэрийн хамаарлыг харуулсан гэрэл зураг болно. Юуны өмнө, зургаан өнцөгт хэлбэрийн квант талст үүсч, хэлбэрээ хадгалангаа ургаж буй нь хүлээн зөвшөөрөгдсөн.
Зураг 8 нь квант талстын EDS спектр (элементийн анализ)-ийн үр дүнг харуулах график болно. Фосфортой хүрэл хавтан дээр бүрэлдсэн талст нь мөнгө ба комплекс лигандаас гаралтай элементийг илрүүлсэн боловч, хүрэл хавтан дээр мөнгөний тиосульфатын ЮООррт уусмалыг бэлтгэж, түүнээс 1 дуслыг дусааж, ойролцоогоор 3 минут байлган, уусмалыг үлээн арилгасан үед зөвхөн мөнгө байгааг илрүүлснээс хэтэрсэнгүй.
(Квант талстыг ургуулах тухай дүгнэлт)
Квантын талст нь ЮООррт мөнгөний тиосульфат комплекс уусмал байх тохиолдолд, фосфортой хүрэл хавтан дээр дусааж 3 минут байлгахад ЮОнм орчим зургаан өнцөгт цилиндр хэлбэртэй болж бүрэлдэж, зургаан өнцөгт цилиндр хэлбэрийн квант талст тус бүр хэдэн нм хэмжээний овгор товгортой байдаг нь SEM зургаас баталгаажсан (Зураг 4, Зураг 5 ба Зураг 6) боловч, металл нано талстад байдаг өөрийн онцлог фасетыг шалган илрүүлж чадалгүй, EDS элементийн анализаар мөнгө ба комплекс лигандаас гаралтай элемент илэрсэн учраас, нийт мөнгөний комплексийн нано талст бөгөөд, түүний гадаргад илрэх овгор товгор нь комплекс дотор мөнгө нь кластер болж квант цэгийг бүрэлдүүлж тэлж байгаа гэж таамаглагдаж байна. Энэхүү шинэ бүтээлийн мөнгөний комплексийн квант талст нь фосфортой хүрэл хавтан дээр бүрэлдэхээс гадна, зэс субстрат дээр зөвхөн мөнгөний нано партиклыг үүсгэн кристалжуулах үзэгдлийг харахад, мөнгөний тиосульфатын тэнцвэрт потенциал 0.33 бөгөөд зэсийн электродын потенциал (0.34)-тэй тэнцүү байгаа тул, зэс субстрат дээр зөвхөн мөнгө (0.80) ялгаран кристалжиж, фосфортой хүрэл байх тохиолдолд 0.22 болон электродын потенциал нь бага зэрэг нам учраас, комплексийн талст кристалжсан гэж бодогдож байна. Тийм учраас, квант талстыг үүсгэхийн тулд, 1) комплексийн уусмалыг 500-2000 ррт гэх шингэн бүсэд байлгах, 2) металл комплексийн усан уусмалын тэнцвэрт потенциалтай харьцуулахад суурь металлын электродын потенциал нь бага зэрэг нам байх, 3) электродын потенциалын ялгавраар металл комплексыг барьцалдуулах нь чухал гэж бодогдоно. Мөн, ЮООррт мөнгөний тиомочевин комплексийн усан уусмалыг ашигласан тохиолдолд ижилхэн байсан.
(Бодит хэрэгжүүлэх жишээ 2)
Бодит хэрэгжүүлэх жишээ 1 дээр бэлтгэсэн фосфортой хүрэл хавтан дээр мөнгөний тиосульфат квант талст субстрат дээр рН11 гипохлорит натрийн усан уусмалыг дусааж, 3 минутын дараа уусмалыг үлээн арилгаж, түүний дараа нэн даруй, ходоодны хорт хавдартай өвчтөний жишээ 12-оос авсан ийлдсийг цэврээр нь 10 дахин шингэлж бэлтгэсэн дээж, шулуун гэдэсний өвчтөний жишээ 12-оос авсан ийлдсийг цэврээр нь 10 дахин шингэлж бэлтгэсэн дээж болон хоргүй өвчин бүхий өвчтөний жишээ 12-оос авсан ийлдсийг цэврээр нь 10 дахин шингэлж бэлтгэсэн дээж тус бүрт 633 нм лазерийн гэрлийг тусгаж, Раман спектрийг хэмжсэн. Ходоодны хорт хавдар болон шулуун гэдэсний хорт хавдрын даамжралын зэрэг ба дагасан оргил утга болон оргил цэгийн интеграл утга хоорондын харилцан хамаарал байгаа нь хүлээн зөвшөөрөгдсөн. Мөн ходоодны хорт хавдар байх тохиолдолд, Раман спектр нь лазер тусгаснаас 1 минутын дараа, шулуун гэдэсний хорт хавдар байх тохиолдолд лазер тусгаснаас 2-3 минутын дараа Раман спектрт оргил цэг илэрсэн. Мөн, D нь ходоодны хорт хавдар, шулуун гэдэсний хорт хавдар, хоргүй өвчний дээжийн раман сарнилын дагасан оргил утгын харьцуулалтыг харуулах график болно. Хоргүй өвчин бүхий өвчтөний хувьд, ходоодны хорт хавдрын дээж болон шулуун гэдэсний хорт хавдрын дээжийн оргил цэг нь нэлээд өндөр байгаа нь хүлээн зөвшөөрөгдсөн. Ходоодны хорт хавдрын дээж ба шулуун гэдэсний хорт хавдрын дээжийн дагасан оргил утга хооронд зөрүү олоход бэрхшээлтэй гэж болох боловч, оргил цэг илрэх хугацаа ба оргил цэгийн интеграл утгыг бодолцож үзэхэд, хоёулангийнх нь хорт хавдрыг тогтоох боломжтой гэж хэлж
Орчуулга: PCT/JP2014/062318 (WQ2014/181816A1^ чадна.
(Мөнгөний оксидын мезо талстын талаарх дүгнэлт 1)
Дээр дурьдсан квант талстын субстрат дээр 5% гипохлорит содын усан уусмалыг дусааж, 2 минут үйлчлүүлээд арилгахад Зураг 12 дээр үзүүлсэн талст бүтэц харагдаж, зүү хэлбэртэй талст ба регби бөмбөг хэлбэртэй бөөгнөрөл ба том бөөгнөрөл үзэгдсэн учраас, тус бүрийн найрлагыг EDS спектр (элементиййн анализ)-ээр дүн шинжилгээ хийхэд, дараах урвалын тэгшитгэлээс зүү хэлбэртэй талсттай хамтдаа мөнгөний хлорид, мөнгөний оксидын композит талстаас бүтсэн нэгдэл гэж бодогдож болох ба, Зураг 12-ын үр дүн нь хлорыг бататгаж чадалгүй, мөнгө ба хүчилтөрөгч нь ноёрхож байсан гэдгийг мэдсэн болно.
Тийм учраас, энэхүү шинэ бүтээлтэй хамааралтай мезо талст бүрэлдэхэд мөнгөний ион ба тиосульфатын ионы оролцоон доор шүлт, хүчлийн урвалаар үүснэ гэж бодогдовч, энгийн усан уусмал дотор мөнгөний оксид бүрэлдэхээс цаашгүй бөгөөд дараах XPS хэмжилтээр мөнгөний хэт исэл ноёрхож бүрдсэн байдаг гэж таамаглагдаж байна.
(Мөнгөний оксидын мезо талстын талаарх дүгнэлт 2)
XPS хэмжилт:
Дээр дурьдсан квант талстын субстратад 25pl гипохлорит натрийн усан уусмалыг 2 минут дусааж, дахин талстжуулсан субстратыг үүсгэн, хүчлээр түлэлгүй тэр чигээр нь (ашиглах төхөөрөмжийн төрөл: ULVAC-PHI Co.,Ltd. / PHI5000 Versa Probe II (Шинжилгээний рентген туяаны фотоэлектрон спектрометр)) Ад ба О-г XPS-ээр хэмжсэн. Мөн, харьцуулах үүднээс, мөнгөний оксидын нунтаг ба мөнгөний хлоридын нунтгийн Ag-г хэмжсэн. Нөгөө талаар, дахин талстжуулсан субстратыг аргон хий кластер ион буугаар 5 минутын турш хүчлээр түлж Ад ба О-ид XPS хэмжилт хийсэн. Зураг 13 ба Зураг 14-ийн XPS хэмжилтийн үр дүнг Зураг 12 дээр үндэслэсэн EDS-ийн үр дүнгээс таамаглахад, 529eV ойролцоох оргил цэг нь мөнгөний хэт исэл (АдО)-ээс гаралтай оргил цэг О бөгөөд, 530eV ойролцоох оргил цэг нь мөнгөний оксид (Ад20)-оос гаралтай оргил цэг О болох нь хүлээн зөвшөөрөгдсөн. Хүчлээр түлсэн тохиолдолд, хүчилтөрөгчийн хэмжээ нь багасах боловч, 520 eV ойролцоох оргил цэгийн мөнгөний хэт исэл (АдО)-ээс гаралтай оргил цэг О нь, 530eV ойролцоох оргил цэг болох мөнгөний оксид (Ад20)- оос гаралтай оргил цэг О-оос их болох нь субстратын зэргэлдээ мөнгөний хэт исэл бүрэлдэж байгааг өгүүлж буй зүйл гэж хэлж болно. Энэ нь мезо талст бүрэлдэх үед катализаторын үйлчлэл ба субстратын электродын потенциал нөлөөлж байна гэж таамаглаж болно. Нэмж дурьдахад, EDS хэмжилт нь дээр дурьдсан дахин талстажсан субстратыг ашиглах төхөөрөмжийн төрөл: Nippon Electronics Co.,Ltd / JSM-7001F(L|ax^raaH орны ялгаралтанд анализ хийх шинжилгээний электрон микроскоп)-ийг ашиглаж явуулсан. Мөн, мөнгөний тиосульфатын квант талстыг гипохлоритын усан уусмал, 0.01 N идэмхий содын усан уусмал, 0.01 N давсны хүчлийн усан уусмал, 0.1 моль натрийн карбонатын усан уусмалаар үйлчилсэн ч ижил үр дүнг гаргаж чадаагүй. Тиймээс, энэ зүү хэлбэртэй талстыг бүрдүүлэхэд мөнгөний ион ба тиосульфатын ионы оролцоотойгоор дээр дурьдсан урвалаас үүсдэг гэж бодогдоно. Мөнгөний оксид нь усан уусмалдаа сөрөг цэнэгтэй болж, гэрлээр ангижран металл мөнгийг ялгаруулна. Мөнгөний хэт исэл нь тийм хандлага үзүүлэхдээ гаргууд учраас, эерэг цэнэг бүхий хорт хавдартай холбоотой бодисыг шингээж.тэрбайтугай шингээсэн хорт хавдартай холбоотой бодисыг мөнгөний партикл хоорондын гадаргын плазмон нэмэгдүүлэх нөлөөг олж авсан гэж бодогдоно.
Аж уйлдвэрт хэрэглэх боломж
Тийм учраас энэхүү шинэ бүтээлийг хэрэглэснээр цус болон биологийн дээжин дэх хорт хавдартай холбоотой бодисыг сонгон илрүүлж чадах тул, Раман спектрээр хорт хавдрыг эрт үед илрүүлж, хорт хавдрын даамжралын зэрэгтэй холбогдолтой шийдвэрийг гаргаж чадна.
ТОВЧ ТАЙЛБАР
Асуудал: Хавдрын эсээс гаралтай чөлөөт ДНХ-ийг хэмжих зориулалттай Раман тоон шинжилгээний аргыг санал болгосон. Шийдвэрлэх арга зам: Мөнгөний хэт ислийг агуулсан мөнгөний оксидын мезо талст бүстэй биочипийг бэлтгэж, уг биочипийн мезо талст бүсэд ийлдэс эсвэл биологийн дээж шингэнийг дусааж, дээж доторх эерэг цэнэгтэй хорт хавдартай холбоотой бодисыг сонгон шингээж, шингээсэн хорт хавдартай холбоотой бодист лазер тусган, тэндээс гарсан Раман сарнилын гэрлийг илрүүлэх үе шатыг агуулах онцлог бүхий гадаргын нэмэгдүүлэх Раман сарнил (SERS)-biH далайцаар хавдрын өвчлөлтийг тодорхойлно. Раман сарнилын спектрт нүүрстөрөгчийн өөрийн онцлог болох D зурвас болон G зурвас дээр, метил бүлгийн өөрийн онцлог бүхий 2900ст~1 -ийн ойролцоох хорт хавдартай холбоотой бодисын онцлог оргил спектр болгон илрүүлнэ. Сонгосон зураг: Зураг 9
ТОМЬЁОЛОЛ
1. Гадаргын нэмэгдүүлэх Раман сарнил (SERS) ашиглан хорт хавдартай холбоотой бодисын Раман тоон хэмжээг тодорхойлох арга болон биочипийн ялгаа нь
- мөнгөний хэт ислийг агуулсан мөнгөний оксидын мезо талст бүстэй
биочипийг бэлтгэх,
- биочипийн мезо талст бүсэд ийлдэс эсвэл биологийн дээж шингэнийг
дусааж уг дээж доторх эерэг цэнэгтэй хорт хавдартай холбоотой
бодисыг сонгон мезо талстад шингээх,
- уг шингээсэн хорт хавдартай холбоотой бодист лазер тусгахад гарсан
Раман сарнилын гэрлийг илрүүлэх үе шатыг агуулсан болно.
2. Аргын томъёоллын 1 дүгээрийн ялгаа нь Раман сарнилын спектрт нүүрстөрөгчийн онцлог болох D зурвас болон G зурвас дээр мөн 2900 см-1 -ийн ойролцоо илрэх хорт хавдартай холбоотой бодисын онцлог оргил спектрыг илрүүлнэ.
3. Аргын томъёоллын 2 дугаарын ялгаа нь хорт хавдартай холбоотой бодис нь чөлөөт ДНХ (гистоныг ороож бүтэх ДНХ: нуклеоиомууд) болон түүнтэй хамааралтай хроматин (хромосом)-ыг агуулсап хавдрын өвчлөлөөр үүсэх бодис болно.
4. Гадаргын нэмэгдүүлэх Раман сарнил (SERS) ашиглан хорт хавдартай холбоотой бодисын Раман тоон хэмжээг тодорхойлох биочипийн ялгаа нь биочип нь дээж доторх хорт хавдартай холбоотой эерэг цэнэгтэй бодисыг сонгон шингээх зориулалттай
а) дээж дотор сөрөг цэнэгийг үзүүлэх,
б) түүнд лазер түсгахад гадаргын сайжруулах резонанс узэгдэл болох Гадаргын нэмэгдуулэх Раман сарнил (SERS)-ыг үзүүлэх мөнгөний хэт ислийг агуулсан мөнгөний оксидын мезо талст бүсээс бүрдэнэ.
5. Биочипийн томъёоллын 4 дүгээрийн ялгаа нь биочип нь Раман сарнилын спектрийн нуурстерөгчийн онцлог болох D зурвас болон G зурвас мөн 2900 см-1-ийн ойролцоо илрэх хорт хавдартай холбоотой бодисын онцлог оргил спектрийг ашиглан уг хорт хавдартай холбоотой бодисын Раман тоон хэмжээг тодорхойлно.
6. Биочипийн томъёоллын 5 дугаарын ялгаа нь хорт хавдартай холбоотой бодис нь чөлөөт ДНХ (гистоныг ороож бутэх ДНХ: нуклеосомууд) болон түүнтэй хамааралтай хроматин (хромосом)-ыг агуулсан хавдрын өвчлөптөөр үүсэх бодис болно.